Lucigenin chemiluminescence assay as an adjunctive tool for assessment of various stages of inflammation: a study of quiescent inflammatory cells.

A simple, fast, precise and biologically relevant toxicity assay for screening cytotoxicity of minerals would have distinct advantages due to its cost benefits and relative savings in time. Furthermore, a bioassay to differentiate acute and chronic in vivo pulmonary reactions could have potential value as predictors of fibrogenicity and pathogenicity. In this study we examined the potential use of lucigenin as a probe to evaluate the correlation between chemiluminescence (CL) generated by alveolar macrophages with the known cytotoxicity and patho genicity by conventional bioassays. In this study, we used small doses of dust (20 microg) to minimize cellular overload and to maintain homeostasis. Crystalline silica a highly fibrogenic dust was used as positive control and results are compared with those for bentonite, kaolin and talc. Among the three minerals compared with silica, bentonite was more reactive (27%) in CL assay and declined sharply compared to other minerals. This sudden decline in bentonite CL is caused by cytotoxicity leading to cell death. CL-induced by talc was comparable to silica and declines slowly. Kaolin on the other hand produced relatively a weaker (25%) CL compared to silica. Our data using relatively low doses of dust suggest that the CL assay may have a better predictive value in cytotoxicity evaluations compared to conventional toxicity assays.

Avaliaçäo respiratória em trabalhadores expostos a poeiras minerais / busca de marcadores inflamatórios = ILI ß, IL6 e TNFÓ / Breathing evaluation in workers exposed to mineral dusts - search of inflammatory markers = IL1ß, IL6 and TNFÓ

A pneumoconiose é uma doença pulmonar de origem ocupacional, considerada de elevada prevalência entre os trabalhadores expostos à poeiras minerais, como a sílica e o asbesto, nos diversos ramos da produçao industrial. A inalaçao destas poeiras minerais pode desenvolver uma fibrose intersticial pulmonar intensa, caracterizada por reaçao inflamatória, liberaçao de fatores quimiotáxicos, produçao de colágeno e conseqüente formaçao de granuloma no pulmao. Os indicadores biológicos podem ser úteis na compreensao deste processo inflamatório do adoecimento pulmonar, na identificaçao da fase pré-fibrogênica, no acompanhamento e no tratamento destas doenças. Realiza um estudo do nível de concentraçao de três citoquinas: Fator de Necrose Tumoral Alfa (TNFÓ, do inglês), interleucina-1ß (IL-1ß) e interleucina-6 (IL-6), no adoecimento pulmonar causado pela exposiçao à sílica e ao asbesto, na pneumoconiose. O objetivo específico foi determinar sua concentraçao no soro sanguíneo de pacientes expostos à sílica e ao asbesto e verificar a associaçao das citoquinas com as exposiçoes e com a pneumoconiose. Foram estudadas 161 pessoas, das quais 107 pacientes trabalhadores expostos à poeiras minerais, sendo 85 expostos à sílica e 22 expostos ao asbesto, e 54 trabalhadores nao expostos no grupo de comparaçao. Para a determinaçao quantitativa da TNFÓ, da IL-1ß e da IL-6, foi coletado sangue de todos os trabalhadores incluídos no projeto e utilizado o método de Elisa para a análise. Encontraram-se, também, diferenças significativas, entre os pacientes com pneumoconiose e o grupo nao exposto para as três citoquinas, em níveis diferenciados. A análise dos resultados nao discriminou o papel das citoquinas na fase pré-fibrótica do adoecimento. Os resultados, no subgrupo exposto à sílica com silicose, nao apresentaram níveis elevados de IL-6 e TNF, mas, apresentaram níveis elevados de IL-1ß das citoquinas dosadas no sangue. No subgrupo exposto ao asbesto com asbestose houve um aumento apenas dos níveis de IL-6. No campo da saúde pública, ainda näo se dispöe de instrumentos capazes de predizerem processos patológicos em trabalhadores expostos à poeiras minerais, principalmente à sílica e ao asbesto. O campo de estudo das citoquinas e outros marcadores mostra-se promissor, mas até o momento, a única arma para reduzir ou eliminar os danos causados por poeiras minerais nos ambientes de trabalho é a retirada do agente nocivo do ambiente.